معلومة

هل من الآمن استخدام حاضنة البيض لتنمية الثقافات البكتيرية؟

هل من الآمن استخدام حاضنة البيض لتنمية الثقافات البكتيرية؟


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

لقد كنت أستخدم حاضنة بيض صغيرة لزراعة البكتيريا البيئية في أطباق بتري. أرتدي دائمًا قفازات ونظارات عندما أتعامل مع الأطباق وأقوم بتلطيخ الجرام. ما مدى احتمالية انتقال البكتيريا التي تنمو على الطبق في الهواء عندما أفتح الحاضنة أو الأطباق نفسها؟


ممارسة جيدة ل تقليل التلوث طبق بتري والبيئة الخارجية من خلال عدم إزالة الغطاء تمامًا طبق بتري: للوصول إلى محتوى طبق بتري باستخدام حلقة التلقيح ، ارفع الغطاء من جانب واحد ، ببطء: مرتفع بما يكفي لدخول حلقة التلقيح ، والحصول على بعض المحتوى ، والخروج.


إذا احتفظت بأطباق بتري مغطاة فلن يكون هناك أي تلوث أو يكون هناك القليل من التلوث وسيكون هناك القليل من الهباء الجوي للإيكولاي عند فتح الحاضنة. كما ذكر @ MartinKivana لا تفتح الأطباق ، esp بالقرب من الحاضنة. في بيئة معقمة أفضل ...

إذا لم تحتفظ بأطباق بتري مغطاة ، فستتلف تجربتك.

يمكنك مسحه بالمبيض من حين لآخر ...

بحيث تغطيه عن ذلك.


التحول البكتيري

التحول هو العملية التي يتم من خلالها إدخال الحمض النووي الغريب في الخلية. يعتبر تحول البكتيريا بالبلازميدات أمرًا مهمًا ليس فقط للدراسات على البكتيريا ولكن أيضًا لأن البكتيريا تستخدم كوسيلة لتخزين وتكرار البلازميدات. وبسبب هذا ، فإن جميع البلازميدات تقريبًا (حتى تلك المصممة للتعبير عن خلايا الثدييات) تحمل أصلًا بكتيريًا للتكاثر وجينًا مقاومًا للمضادات الحيوية لاستخدامه كعلامة انتقائية في البكتيريا.

أجرى العلماء العديد من التعديلات الجينية لإنشاء سلالات بكتيرية يمكن تحويلها بسهولة أكبر والتي ستساعد في الحفاظ على البلازميد دون إعادة ترتيب DNA البلازميد. بالإضافة إلى ذلك ، تم اكتشاف علاجات محددة تزيد من كفاءة التحول وتجعل البكتيريا أكثر عرضة للتحول الكيميائي أو الكهربائي ، مما ينتج عنه ما يشار إليه عادة باسم "الخلايا المختصة".

تبيع العديد من الشركات الخلايا المختصة ، والتي يتم تجميدها وتكون جاهزة لتحقيق كفاءات تحويل مثالية عند الذوبان. للحصول على أعلى كفاءة تحويل ، نوصيك باتباع التعليمات المرفقة بخلاياك المختصة.

التحديث الأخير: 13 نوفمبر 2017

شاهد فيديو البروتوكول أدناه لمعرفة كيفية عزل المستعمرات البكتيرية المفردة.

  • حاضنة اهتزاز عند 37 درجة مئوية
  • حاضنة ثابتة عند 37 درجة مئوية
  • حمام مائي عند 42 درجة مئوية
  • دلو ثلج مملوء بالثلج
  • أنابيب الطرد المركزي الدقيقة
  • جهاز نشر معقم
  • صفيحة أجار LB (مع مضاد حيوي مناسب)
  • وسائط LB أو SOC
  • الخلايا المختصة
  • الحمض النووي الذي ترغب في تحويله

تلوث ثقافة الخلية

التلوث البيولوجي هو الرعب لدى كل شخص يعمل في زراعة الخلايا. عندما تصاب الثقافات بكائنات دقيقة ، أو تتلوث بخلايا غريبة ، يجب عادةً تدمير هذه الثقافات. نظرًا لأن مصادر تلوث المستنبت موجودة في كل مكان ويصعب تحديدها والقضاء عليها ، فلا يوجد مختبر لزراعة الخلايا لا يزال غير متأثر بهذا القلق. مع الزيادة المستمرة في استخدام زراعة الخلايا للأبحاث البيولوجية ، وإنتاج اللقاحات ، وإنتاج البروتينات العلاجية للطب الشخصي وتطبيقات الطب التجديدي الناشئة ، يظل تلوث الثقافة قضية مهمة للغاية.

مقدمة

تستمر زراعة الخلايا في اتجاه 60 عامًا من زيادة الاستخدام والأهمية في البحث الأكاديمي والطب العلاجي واكتشاف الأدوية ، مصحوبًا بتأثير اقتصادي متضخم. 1،2 العلاجات الجديدة واللقاحات والأدوية ، وكذلك الأعضاء المتجددة والمخلقة ، ستأتي بشكل متزايد من خلايا الثدييات المستنبتة. مع زيادة استخدام وكفاءة تقنيات زراعة الخلايا ، يأتي فهم أفضل للمخاطر والمشاكل المرتبطة بتلوث زراعة الخلايا. في القرن الحادي والعشرين ، توجد طرق اختبار وأدوات وقائية أفضل ، ويتطلب الوعي بمخاطر التلوث وآثاره أن يظل مربو الخلايا متيقظين ويمكن أن يكون للتلوث غير المكتشف آثار واسعة النطاق في اتجاه مجرى النهر.

التلوث البيولوجي: رفيق مشترك

كان اكتشاف البنسلين بالصدفة في عام 1928 أحد تلك الحوادث النادرة التي لا يمكن لمعظم الباحثين إلا أن يحلموا بها. بعد عودته من إجازة صيفية ترك خلالها بلا مبالاة مجموعة من أطباق بتري مكدسة في زاوية من معمله ، اكتشف ألكسندر فليمنج أحد أقوى الأدوية في القرن العشرين و rsquos. لاحظ فليمنغ أن إحدى الثقافات البكتيرية كانت ملوثة بفطر ، ولكن تم تدمير مستعمرات المكورات العنقودية التي كانت تحيط بالفطر مباشرة. كان الفطر ، بالطبع ، Penicillium notatum ، وذهب فليمنج لاكتشاف المضادات الحيوية. ومع ذلك ، يعد هذا مثالًا نادرًا جدًا للتلوث الذي يؤدي في الواقع إلى تقدم مسار البحث العلمي. بالنسبة للجزء الأكبر ، يظل تلوث الثقافات هو أسوأ كابوس لكل عالم. لخصت كارولين كاي لينكولن ومايكل جابريدج المشكلة في عام 1998: & ldquo لا يزال تلوث ثقافة الخلايا يمثل مشكلة رئيسية في منصة البحث الأساسية وكذلك بالنسبة لمصنعي المنتجات الحيوية. التلوث هو ما يهدد حقًا استخدام مزارع الخلايا ككواشف وأدوات موثوقة. & rdquo 3

يعد التلوث البيولوجي لمزارع خلايا الثدييات أكثر شيوعًا مما تعتقد. تشير الإحصاءات الواردة في منتصف التسعينيات إلى أن ما بين 11 في المائة و 15 في المائة من الثقافات في مختبرات الولايات المتحدة كانت مصابة بأنواع الميكوبلازما. 4 حتى مع التعرف بشكل أفضل على المشكلة والاختبار الأكثر صرامة للكواشف والوسائط المحضرة تجاريًا ، كان معدل حدوث نمو الميكوبلازما في ثقافات المختبرات البحثية 23 بالمائة في دراسة حديثة واحدة ، 5 وفي عام 2010 كانت نسبة مذهلة بلغت 8.45 بالمائة من المزارع التي تم اختبارها تجاريًا من المستحضرات الصيدلانية الحيوية كانت مصادرها ملوثة بالفطريات والبكتيريا ، بما في ذلك الميكوبلازما. 6

في معمل الأبحاث ، لا يعد التلوث مجرد تهيج عرضي ، ولكنه قد يكلف موارد قيمة بما في ذلك الوقت والمال. في نهاية المطاف ، يمكن أن يؤثر التلوث على مصداقية مجموعة بحثية أو يجب أحيانًا سحب منشورات علماء معينة بسبب مخاوف من تلوث العينة بأثر رجعي أو النتائج المبلغ عنها التي تتحول إلى قطع أثرية. في صناعة المستحضرات الصيدلانية الحيوية ، يمكن أن يكون للتلوث تأثير أكثر دراماتيكية عندما يجب التخلص من عمليات الإنتاج بأكملها. لذلك ، من المهم للغاية فهم كيفية حدوث تلوث العينة والطرق المتاحة للحد منه ومنعه في نهاية المطاف.

ما الذي يسبب التلوث البيولوجي؟

يمكن تقسيم الملوثات البيولوجية إلى مجموعتين فرعيتين اعتمادًا على سهولة اكتشافها في الثقافات ، وأسهلها هي معظم البكتيريا والفطريات. تلك التي يصعب اكتشافها ، وبالتالي من المحتمل أن تكون مشاكل أكثر خطورة ، تشمل الميكوبلازما ، والفيروسات ، والتلوث المتبادل من قبل خلايا الثدييات الأخرى.

البكتيريا والفطريات

البكتيريا والفطريات ، بما في ذلك العفن والخمائر ، موجودة في كل مكان في البيئة وقادرة على الاستعمار والازدهار بسرعة في بيئة زراعة الخلايا الغنية. صغر حجمها ومعدلات نموها السريعة تجعل هذه الميكروبات أكثر ملوثات زراعة الخلايا شيوعًا. في حالة عدم وجود المضادات الحيوية ، يمكن عادةً اكتشاف البكتيريا في مزرعة في غضون أيام قليلة من التلوث ، إما عن طريق الملاحظة المجهرية أو من خلال تأثيرها المباشر على المزرعة (تحولات الأس الهيدروجيني ، والتعكر ، وموت الخلايا). تتسبب الخمائر عمومًا في أن يصبح وسط النمو غائمًا جدًا أو عكرًا ، في حين أن القوالب ستنتج الفطريات المتفرعة ، والتي تظهر في النهاية على شكل كتل فروي تطفو في الوسط.

الميكوبلازما

الميكوبلازما هي بالتأكيد الأكثر خطورة وانتشارًا من بين جميع الملوثات البيولوجية ، نظرًا لانخفاض معدلات الكشف عنها وتأثيرها على خلايا الثدييات. على الرغم من أن الميكوبلازما عبارة عن بكتيريا تقنيًا ، إلا أنها تمتلك خصائص معينة تجعلها فريدة من نوعها. إنها أصغر بكثير من معظم البكتيريا (0.15 إلى 0.3 أم) ، لذلك يمكن أن تنمو إلى كثافة عالية جدًا دون أي علامات مرئية. كما أنها تفتقر إلى جدار خلوي ، وهذا ، جنبًا إلى جنب مع صغر حجمها ، يعني أنها يمكن أن تنزلق أحيانًا عبر مسام أغشية المرشح المستخدمة في التعقيم. نظرًا لأن المضادات الحيوية الأكثر شيوعًا تستهدف جدران الخلايا البكتيرية ، الميكوبلازما مقاومة.

الميكوبلازما ضارة للغاية لأي مزرعة خلوية: فهي تؤثر على الخلايا المضيفة و [رسقوو] التمثيل الغذائي والتشكل ، وتسبب انحرافات الكروموسومات والأضرار ، ويمكن أن تثير استجابات اعتلال خلوي ، مما يجعل أي بيانات من الثقافات الملوثة غير موثوقة. في أوروبا، الميكوبلازما تم العثور على مستويات التلوث لتكون عالية للغاية و [مدش] بين 25 في المئة و 40 في المئة و [مدشاند] المعدلات المبلغ عنها في اليابان كانت عالية تصل إلى 80 في المئة. تشير الإحصاءات إلى أن المعامل التي تختبر بشكل روتيني الميكوبلازما يكون معدل حدوث التلوث أقل بكثير بمجرد اكتشافه ، ويمكن احتواء التلوث والقضاء عليه. اختبار الميكوبلازما يجب إجراؤها مرة واحدة على الأقل شهريًا ، وهناك مجموعة كبيرة من الأطقم المتاحة تجاريًا. الطريقة الوحيدة لضمان اكتشاف الأنواع هي استخدام طريقتين مختلفتين على الأقل للاختبار ، مثل تلطيخ DAPI و PCR. 5

يحب الميكوبلازما، لا تقدم الفيروسات إشارات بصرية لوجودها فهي لا تغير الرقم الهيدروجيني لوسط الاستزراع أو تؤدي إلى التعكر. نظرًا لأن الفيروسات تستخدم مضيفها للتكاثر ، يمكن أن تكون الأدوية المستخدمة لمنع الفيروسات شديدة السمية للخلايا التي يتم استزراعها. ومع ذلك ، فإن الفيروسات التي تسبب ضررًا للخلية المضيفة تميل إلى أن تكون ذاتية الحد ، لذا فإن مصدر القلق الرئيسي للتلوث الفيروسي هو احتمال إصابة موظفي المختبر بالعدوى. يجب على أولئك الذين يعملون مع خلايا بشرية أو غيرها من الرئيسيات استخدام احتياطات أمان إضافية.

أنواع خلايا الثدييات الأخرى

يعد التلوث المتقاطع بين مزرعة خلوية وأنواع أخرى من الخلايا مشكلة خطيرة تم اعتبارها مؤخرًا فقط مثيرة للقلق. 7،8 ما يقدر بنحو 15 في المائة إلى 20 في المائة من خطوط الخلايا المستخدمة حاليًا تم التعرف عليها بشكل خاطئ ، وهي مشكلة بدأت مع أول خط من الخلايا البشرية ، هيلا ، وهو سرطان غدي عنق الرحم عدواني بشكل غير عادي تم عزله من هنريتا لاكس في عام 1952. خلايا هيلا هي عدوانية لدرجة أنه بمجرد إدخالها عن طريق الخطأ في مزرعة ما ، فإنها تتفوق بسرعة على الخلايا الأصلية. لكن المشكلة لا تقتصر على هيلا ، فهناك العديد من الأمثلة لخطوط الخلايا التي تتميز بالخلايا البطانية أو خلايا سرطان البروستاتا ولكنها في الواقع خلايا سرطان المثانة ، وتوصف بأنها خلايا سرطان الثدي ولكنها في الواقع خلايا سرطان المبيض. في هذه الحالات ، تحدث المشكلة عندما يتكيف نوع الخلية الغريبة بشكل أفضل مع ظروف المزرعة ، وبالتالي تحل محل الخلايا الأصلية في المزرعة. من الواضح أن هذا التلوث يمثل مشكلة بالنسبة لجودة الأبحاث المنتجة ، ويمكن أن يؤدي استخدام الثقافات التي تحتوي على أنواع خلايا خاطئة إلى تراجع النتائج المنشورة.

مصادر الملوثات البيولوجية في المختبر

من أجل تقليل تواتر التلوث البيولوجي ، من المهم فهم كيفية دخول الملوثات البيولوجية إلى أطباق المزرعة. في معظم المختبرات ، تكون أكبر مصادر الميكروبات هي تلك التي تصاحب العاملين في المختبر. يتم تعميمها كجسيمات محمولة في الهواء وهباء الجوي أثناء عمل المختبر العادي. يمكن أن ينتج عن الحديث والعطس والسعال كميات كبيرة من الهباء الجوي. يمكن للملابس أيضًا إيواء ونقل مجموعة من الكائنات الحية الدقيقة من خارج المختبر ، لذلك من الضروري ارتداء معاطف المختبر عند العمل في معمل زراعة الخلايا. حتى مجرد التنقل في المختبر يمكن أن يخلق حركة هواء ، لذلك يجب تنظيف الغرفة كثيرًا لتقليل جزيئات الغبار.

يمكن لبعض المعدات المختبرية ، مثل أجهزة الماصات ، أو الدوامات ، أو أجهزة الطرد المركزي بدون أوعية الاحتواء الحيوي ، أن تولد كميات كبيرة من الجسيمات والأيروسولات المحملة بالميكروبات. تعد معدات المختبرات المستخدمة بكثرة ، بما في ذلك الحمامات المائية والثلاجات والمجاهر وغرف التخزين البارد ، خزانات للميكروبات والفطريات. يمكن أن تكون الحاضنات التي تم تنظيفها وصيانتها بشكل غير صحيح بمثابة منزل مقبول للفطريات والبكتيريا. يمكن أن يؤدي اكتظاظ المواد في الأوتوكلاف أثناء التعقيم أيضًا إلى التخلص غير الكامل من الميكروبات.

يمكن أيضًا أن تكون وسائط الاستنبات وأمصال الأبقار والكواشف والأدوات البلاستيكية مصادر رئيسية للملوثات البيولوجية. بينما تم تحسين طرق الاختبار التجارية كثيرًا مقارنة بالعقود السابقة ، فمن الأهمية بمكان استخدام المواد المعتمدة لاستخدام زراعة الخلايا. يمكن أن يحدث التلوث المتبادل عند العمل مع خطوط خلايا متعددة في نفس الوقت. يجب أن يكون لكل نوع خلية حلوله وإمداداته الخاصة ويجب معالجته بشكل منفصل عن الخلايا الأخرى. يعد الاستخدام غير المقصود للإمدادات أو الوسائط أو المحاليل غير المعقمة أثناء إجراءات زراعة الخلايا الروتينية المصدر الرئيسي لانتشار الميكروبات.

يعد التلوث مشكلة منتشرة في زراعة الخلايا ، ومن الضروري إدارة أي مخاطر بشكل فعال حتى يتم الحفاظ على سلامة التجربة. يمكن استخدام المضادات الحيوية لبضعة أسابيع لضمان حل التلوث الجرثومي المعروف ، ومع ذلك ، يجب تجنب الاستخدام الروتيني. لا يقتصر التضمين المنتظم للمضادات الحيوية على الكائنات المقاومة فحسب ، بل يخفي أيضًا أي عدوى منخفضة المستوى وأخطاء اعتيادية في تقنية التعقيم.

أفضل نهج لمكافحة التلوث هو أن يحتفظ كل شخص بسجلات لجميع أعمال زراعة الخلايا بما في ذلك كل ممر ، والمظهر العام للخلية ، والتلاعب بما في ذلك التغذية ، والتقسيم ، وعد الخلايا. في حالة حدوث تلوث ، قم بتدوين الخصائص والوقت والتاريخ. بهذه الطريقة ، يمكن تحديد أي تلوث في وقت حدوثه ويمكن إجراء تحسينات على تقنيات التعقيم أو بروتوكولات المختبر. في المقالة التالية من هذه السلسلة ، نستكشف بمزيد من التفصيل التدابير الفعالة لمنع التلوث ، ولا سيما الدور الرئيسي لثاني أكسيد الكربون.2 حاضنة.


النمو الانتقائي

سبب آخر للاحتضان في درجات حرارة مختلفة هو تعزيز نمو مجموعة مستهدفة من البكتيريا. على سبيل المثال ، على الرغم من أن كل من مسببات الأمراض والبكتيريا البيئية الموجودة في الداخل هي نباتات متوسطة ، فإن مسببات الأمراض تنمو بشكل أسرع من السلالات البيئية عند 37 درجة مئوية (98 درجة فهرنهايت) ، وهي درجة حرارة جسم الإنسان. والعكس صحيح عند 25 درجة مئوية (77 فهرنهايت) ، وهي درجة حرارة معظم المباني. نظرًا لأن مختبرات تدريس الطلاب غالبًا ما ترغب في منع نمو مسببات الأمراض ، فغالبًا ما يتم احتضان الثقافات عند 25 درجة مئوية (77 فهرنهايت).


الحاضنات الميكروبيولوجية

الحضانة الناجحة هي خطوة أساسية في سير عملك اليومي. تم تصميم حاضنات الميكروبيولوجيا الحرارية والمبردة مع وضع العينات في الاعتبار لتحقيق نتائج يمكنك الاعتماد عليها.

لتصفح محفظتنا الكاملة أو السماح لأحد خبرائنا بمساعدتك في الاختيار.

حاضنات هيراثيرم الميكروبيولوجية

حاضنات هيراثيرم المبردة

حاضنة دقيقة مبردة بدرجة حرارة منخفضة *

تتوفر حاضنات للدراسات الميكروبيولوجية بتقنيات مختلفة لمعالجة درجات حرارة الحضانة المحددة اللازمة للتطبيق.

الحاضنات الميكروبيولوجية، والتي تسمى أيضًا حاضنات "الحرارة فقط" أو "القياسية" تحتوي على عناصر تسخين ، ويمكن أن توفر درجات حرارة حضانة أعلى من درجة الحرارة المحيطة فقط. إذا كانت درجة حرارة المختبر حوالي 22 درجة مئوية ، فيمكنها فقط معالجة درجات حرارة الحضانة التي تزيد عن 27 درجة مئوية أو حتى 30 درجة مئوية.

حاضنات مبردة، التي تسمى أيضًا حاضنات "التبريد" لها تبريد وتدفئة ، ويمكن أن توفر نطاقًا أوسع من درجات الحرارة - وتقدم أيضًا درجات حرارة قريبة من درجة حرارة المحيط أو حتى أقل من درجة حرارة المحيط. وعادة ما تغطي أيضًا نطاق درجة حرارة التفريخ فوق المحيط - كما تفعل حاضنات "ميكروبيولوجية" أو حاضنات "حرارية فقط". نظرًا للتكنولوجيا الأكثر تعقيدًا المستخدمة ، تعد الحاضنة المبردة استثمارًا أعلى.


ما هي المبادئ التوجيهية لاستزراع الأرتيميا؟

فوائد تغذية الأرتيميا الحية معروفة ومقبولة في مجتمع أحواض السمك. بدلاً من ذلك ، هناك العديد من الأنظمة الغذائية الصناعية الخاملة المريحة والمجهزة جيدًا والتي تهدف إلى التخلص تمامًا من الحاجة إلى مثل هذا الطعام الحي. هذه الحميات المحضرة ، والأهم من ذلك ، الأحماض الأمينية ، والدهون ، والفيتامينات التي تحتويها هي ، إن لم تكن بدائل كاملة للأعلاف الحية ، غالبًا ما تكون إضافات ضرورية لنظام غذائي لنوع واحد يفتقر إلى واحد أو أكثر من العناصر الغذائية الأساسية.

بعد قولي هذا ، نادرًا ما يؤدي جسيم غير مبلل من النشا الجيلاتيني ودقيق السمك المجفف إلى إشعال استجابة التغذية في الأسماك مثل سلوك السباحة المتشنج للروبيان الحي. لهذا السبب ، سيكون الأربيان الحي دائمًا جزءًا لا يتجزأ من الحل للحفاظ على مجموعات أحواض السمك الصحية.

بالإضافة إلى التحرك حول عمود الماء ، فإن الجمبري الحي يحتوي على عدد من الصفات المفيدة الأخرى ، وهي:

  • فهي لينة وسهلة الهضم وتحتوي على إنزيمات تساعد الأسماك على الاستفادة بشكل أفضل من الأعلاف الأخرى
  • فهي غنية بالبروتين ، وتتراوح من 55٪ إلى 60٪ بروتين بالوزن الجاف ، مما يدعم زيادة الوزن بسرعة في الأسماك الصغيرة
  • يمكن إثرائها بأعلاف أو مواد مضافة أخرى ، وهي عملية يشار إليها غالبًا باسم "التغليف الحيوي" من أجل توصيل مواد HUFAs أو المضادات الحيوية أو العناصر الغذائية الأخرى إلى الأنواع المستهدفة (انظر SELCO)
  • يمكن إطعامها للأسماك البحرية وأسماك المياه العذبة ، والبقاء على قيد الحياة والسباحة لساعات و [مدش] حتى في المياه العذبة
  • تنشأ في البيئات الحيوية شديدة الملوحة ، وبالتالي فهي نادرًا ما تكون ناقلة للأمراض التي تصيب الأسماك
  • تنمو بسرعة ، وتتضاعف في الوزن 500 ضعف في ثلاثة إلى أربعة أسابيع ويزداد حجمها من 450 ميكرون إلى 1.5 سم في الطول.

ومع ذلك ، فإن تربية الجمبري البحري حتى النضج بأعداد مفيدة ليست مهمة سهلة ويمكنك أن تتوقع قضاء الكثير من الوقت فيه ، إن لم يكن أكثر ، كما تفعل في تربية الأسماك الصغيرة ورعايتها في كثير من الأحيان مع نتائج أقل من المأمول. . تم تصميم التمهيدي التالي للمساعدة في تجنب الحاجة إلى ارتكاب الأخطاء الأكثر شيوعًا و [مدش] في أغلب الأحيان ، أخطاء الإفراط في التخزين ، والإفراط في التغذية ، ونقص التغذية ، وعدم كفاية التهوية ، ونقص الترشيح ، وتوفير الأعلاف غير المناسبة.

بالنظر إلى الطرق التي لا تعد ولا تحصى لقتل هذه المخلوقات عن غير قصد ، حتى في بيئة مريحة وخاضعة للرقابة ، يبدو من غير البديهي ، إن لم يكن مثبطًا تمامًا لعالم الأحياء المائية ، أن حيوانًا من أصل ما قبل التاريخ ، في بيئته الطبيعية ، يمكن تركه مرتفعًا وجافًا في الصيف ، جافًا لأشهر تحت أشعة الشمس الحارقة ، ثم نُقل بالقوة إلى مناخ بعيد في أمعاء مهاجر طيور ، وأعيد ترسيبه في بحيرة شديدة الملوحة خالية من الحياة ، وتعرضت لدرجات حرارة تحت التجمد ، فقط ليخرج منها الكبسولة لتزدهر مرة أخرى وحتى تنتشر.

بدون مزيد من الاجترار ، لنفترض أننا فقسنا البيض بنجاح ونرغب في استزراع الأرتيميا. ألا يمكننا ، كما طلب مشرف الموقع حسن النية ، إرسالهم إلى مدرسة فرنسية؟

خزان الثقافة

يمكن أن يكون خزان الاستزراع بسيطًا مثل دلو سعة 5 جالون أو مشاركًا مثل خزان Kreisel بقيمة 500 دولار. تتمثل اعتبارات التصميم المهمة ، عند اختيار أو بناء خزان الاستزراع ، في السماح بالتحكم في درجة الحرارة بالتهوية الكافية (للحفاظ على مستويات الأكسجين المذاب وكذلك لتعليق جزيئات الطعام) ترشيح المياه الداخلية أو الخارجية و / أو الاستبدال الجزئي للماء والتركيز و إخلاء المخلفات والوفيات والبراز (من خلال أنابيب الصرف المفحوصة أو الشفط). تتنوع أنظمة الاستزراع ، من أنظمة الدُفعات أو الأنظمة الثابتة ، إلى خزانات التدفق المعقدة للاستزراع عالي الكثافة. إذا كان القصد هو مجرد مراقبة عدد قليل من الأرتيميا ، فإن حوض السمك المزود بفلتر فرعي / طيني وواحد أو اثنين من الأنابيب الرأسية الاتجاهية يعد مثاليًا.

جورب

لتحسين فرصك في النجاح ، ابدأ بتخزين 1000 حيوان لكل لتر أو أقل.

كيف يحسب المرء 1000 جمبري صغير ملحي؟ أسهل طريقة لإدارة تعداد الأرتيميا هي أخذ عينة من مجموعة سكانية موزعة عشوائيًا عن طريق استخراج أجزاء صغيرة من الكل ، والعد ، ثم الاستقراء. لنفترض أننا بدأنا بجرام واحد (حوالي نصف ملعقة صغيرة) من بيض فقس بنسبة 80٪. إذا ، بعد 24 ساعة من الحضانة ، استعدنا معظم الجمبري الملحي حديث الفقس ، فسيكون لدينا ما يزيد عن 200000 روبيان صغير ملحي!

لاختبار نظريتنا الخاصة بأخذ عينات الكوة ، انقل جميع الحيوانات إلى زجاجة سعة لتر واحد تحتوي على مياه بحر نظيفة مع تهوية. ستعمل التهوية على إبقاء الجمبري الملحي معلقًا ، وبالتالي يتم توزيعه عشوائيًا في جميع أنحاء المخروط أو الزجاجة. باستخدام ماصة واحدة مليلتر ، استخرج مليلترًا واحدًا من الماء ، وباستخدامه ، ما يقرب من 1/1000 من إجمالي السكان (1 لتر = 1000 مليلتر). إذا كانت تقنية أخذ العينات لدينا مناسبة (يُنصح باستخدام التكرارات) ، فيجب أن يكون لدينا حوالي 200 حيوان في عينة القسمة الخاصة بنا. في حالة عدم توفر الماصة ، يمكن استخدام قطارة معايرة لسحب عينة مُقاسة من الزجاجة.

ملحوظة: إذا كانت هذه العملية قد تجاوزت بالفعل قدرتك على تحمل الملل ، فقد ترغب في التوقف هنا ، وإثراء جميع الجمبري البحري المحصود حديثًا والموجود في زجاجة سعة لتر واحد باستخدام SELCO ، وإطعام الروبيان الملحي المحصن للأسماك أو فرس البحر. . ولكن ، إذا كنت تصر على روبيان ملحي أكبر حجمًا وأكثر سمكًا ، فتابع القراءة. فقط تذكر و [مدش] كان لديك فرصتك!

مدى الملوحة المفضل لاستزراع الجمبري المالح هو 35-40 جزء لكل تريليون (الوزن النوعي 1.024-1.028). على عكس إعداد محاليل التفقيس ، حيث تكون العلامات التجارية المنزلية لملح الخبز وملح الكوشر والملح الشمسي كافية ، يجب خلط مياه المزرعة مسبقًا باستخدام ملح بحري من درجة حوض السمك. تذكر أن تخلط مسبقًا وتخزن مياهًا إضافية لاستخدامها لاحقًا. ستحتاج إليها!

يجب أن يكون الرقم الهيدروجيني الأولي بين 7.5 و 8. من المرجح أن ينخفض ​​الرقم الهيدروجيني خلال فترة الاستزراع ويمكن تعديله لأعلى بإضافة صودا الخبز أو NaHCO3. راقب درجة الحموضة بانتظام واضبطها حسب الحاجة.

الأرتيميا تتحمل بشكل عام مستويات الأكسجين الذائبة المنخفضة. غالبًا ما يشار إلى إجهاد الأكسجين عن طريق احمرار الحيوانات الناجم عن زيادة وجود h & aeligmoglobin. عادةً ما يؤدي توفير التهوية الكافية لإبقاء الطعام معلقًا على التخلص من أي مخاوف من الأكسجين الذائب. ضع في اعتبارك أن الفقاعات الصغيرة هي مركبات أكثر فاعلية في نقل الأكسجين ، لكن تلك الفقاعات الدقيقة جدًا تفسد أطراف السباحة وتتداخل مع التغذية. إذا انخفض مستوى الأكسجين المذاب إلى أقل من 2.5 مجم / لتر -1 ، أضف هوائيات إضافية

يجب الحفاظ على درجة الحرارة بين 20 درجة مئوية و 25 درجة مئوية (68 درجة فهرنهايت - 79 درجة فهرنهايت). تذكر أن الماء البديل يجب أن يكون بدرجة حرارة مماثلة لتجنب الصدمة الحرارية.

تغذية

الأرتيميا هي مغذيات ترشيح مستمرة وغير انتقائية. 2 يتمثل التحدي الأكثر صعوبة في زراعة الأرتيميا في توفير علف بالحجم المناسب بتركيزات كافية دون المساس بجودة المياه دون مبرر. لحسن الحظ ، هناك عدد من الأعلاف التي يسهل الحصول عليها والتي تعتبر مثالية من حيث الحجم (أقل من 20 ميكرون) والمحتوى الغذائي.

يلعب تصميم الخزان والتهوية دورًا مهمًا في توزيع التغذية في جميع أنحاء عمود الماء. يجب أن تبقى الأعلاف معلقة حتى يتم استخدامها. يتم تحقيق ذلك عن طريق استخدام الجسور الهوائية الاتجاهية ، وحجارة الهواء ، وتدفق المياه الراجعة. عند استخدام الأعلاف الجافة ، يتم الحصول على تعليق أفضل للطعام عن طريق الخلط المسبق للعلف بمياه البحر النظيفة.

يجب مراقبة مستويات النيتروجين. يجب أن تظل مستويات NO2-N أقل من 320 مجم / لتر -1.3 يتم التحكم في جودة المياه عن طريق مجموعة من الترشيح الميكانيكي ، سواء خارجي أو داخلي ، أو التخفيف بمياه نظيفة جديدة.

من أجل الحفاظ على جودة المياه الكافية ، يجب إزالة المواد الصلبة العالقة والأغذية غير المأكولة والبراز والمخلفات بانتظام. هذا يمثل اللغز: كيف يمكن إزالة هذه الملوثات بكفاءة دون إزالة الطعام أيضًا؟ لسوء الحظ ، لا توجد إجابة سهلة. الأساليب الموصوفة في الأدب هي فن أكثر من كونها علمًا ، أو تم التغاضي عنها تمامًا. لا يمكن تجنب بعض الخسائر في كثافة الغذاء بسبب الترشيح. غالبًا ما تنطوي الحلول الوسط على تصفية القطعان الكبيرة فقط (السماح للأطعمة والمواد الصلبة المعلقة بالمرور) ، مما يسمح للقطعان بالاستقرار أو التركيز بالقرب من مصارف الصرف قبل الإزالة ، واستخدام فترات أطول للاحتفاظ بالمياه ، و / أو التبديل بين دورات الترشيح والتغذية المتقطعة.

مع نمو الحيوانات ، يمكن استخدام مرشحات ذات أحجام شبكية أكبر. سيكون للمرشح النموذجي في البداية فتحات 100 ميكرون. يمكن زيادة هذه الفتحات إلى 350 ميكرون عندما يبلغ عمر الحيوانات حوالي أسبوعين. يجب تنظيف المرشحات بانتظام. سيساعد وضع أحجار الهواء أمام مرشحات النفايات السائلة في منع تعمية المرشح. من الواضح أن زيادة معدلات تبادل المياه وزيادة أحجام فتحات المرشح سوف تتطلب زيادة متناسبة في معدلات التغذية من أجل الحفاظ على كثافة الخلايا الغذائية المرغوبة.

يمكن التحقق من كثافة المزرعة وكثافة الخلايا الغذائية وصحة الحيوان عن طريق إزالة كوب الماء وفحصه بشكل روتيني وتثبيته أمام الضوء لفحصه عن كثب. من الممكن ملاحظة امتلاء الأمعاء وتحديد ما إذا كانت الحيوانات تتغذى بشكل كافٍ. يمكن أيضًا قياس كثافة الخلايا الغذائية عن طريق إدخال قرص Secchi في ماء الخزان لقياس النقاء. يتم ملاحظة وتسجيل العمق الذي يتم إنزال قرص Secchi في الماء قبل حجبه. يتم الحفاظ على أسعار التغذية وأسعار الصرف عند مستوى يناسب نظامك الخاص.

والعلف المفضل للأرتيميا هو الدياتومات الحية المستزرعة. تم استخدام عدد من الأنواع بنجاح ، بما في ذلك النانوكلوروبسيس ص. ، تتراسيلميس ص. و دوناليلا ص. يتطلب توفير الدياتومات الحية ، بالطبع ، مضاعفة الجهود بما يتناسب مع عدد الأرتيميا المراد تغذيتها. كما ذكرنا من قبل ، يعتبر الأرتيميا من الأعلاف المستمرة ، وبكثافة عالية ، تنظف المياه بسرعة من الدياتومات. الاعتماد على مزارع الدياتوم الحية ، على الرغم من أنه ممكن عمليًا ، يجب أن يتم ذلك مع بدائل الأعلاف المجمدة أو الجافة التي يسهل الوصول إليها في حالة تعطل مزارع الطحالب.

من أفضل الخيارات في الأعلاف المتوفرة بسهولة والتي وجدناها لزراعة الأرتيميا هي معاجين الطحالب المحفوظة بالتبريد ، على وجه الخصوص النانوكلوروبسيس ص. أو مزيج تاهيتي ، الذي يحتوي على العديد من أنواع الطحالب وفيتامين سي المستقر. يمكن أن يسمح استخدام المعاجين المبردة بكثافة الخلايا المعروفة للمزارع بمواءمة مستويات التغذية بسرعة مع كثافة ونمو سكان الأرتيميا.

الأعلاف الأخرى التي تم استخدامها بنجاح في زراعة الأرتيميا هي الخمائر المجففة بالرش وحيدة الخلية ، وأبرزها تورولا. الأعلاف الأخرى التي تم استخدامها لاستزراع الجمبري المالح هي أشكال مجهرية من نخالة الأرز ونخالة الذرة وفول الصويا. 4 وغالبًا ما تستخدم هذه الأعلاف مع طرق أخرى. يمكن تحقيق الحجم المناسب للجزيئات عن طريق تحويل النخالة بمياه البحر إلى ميكرونة (باستخدام خلاط كهربائي) وترشيحها من خلال 250 شبكة أو كيس أدق. رذاذ جاف أرثروسبيرا بلاتنسيس (سابقا سبيرولينا بلاتنسيس) أيضًا للحفاظ على الأرتيميا. يجب تجنب الأعلاف التي تتسرب بسهولة من المغذيات إلى الماء ، لأنها ستساهم في زيادة الأحمال البكتيرية ، وزيادة الطلب على الأكسجين ، وتلوث الزوائد السابحة.

عام

كما ذكرنا سابقًا ، هناك العديد من الأنظمة المتنوعة التي تم تصميمها لتربية الجمبري البحري. بالنسبة للثقافة عالية الكثافة (أكثر من 10000 حيوان لكل لتر) ، يتطلب البقاء على قيد الحياة ترشيحًا ميكانيكيًا قويًا وتبادل المياه و [مدش] في الواقع ، وهو نظام مجرى مائي مزود بمعدات معالجة وترشيح إضافية. تعتمد أنظمة "الدُفعات" ذات الكثافة المنخفضة (1000 حيوان / لتر) على مزيج من تبادل المياه المنتظم أو التخفيف بمياه البحر النظيفة والإزالة المنتظمة للفضلات. في نظام الدُفعات ، يتم خفض معدلات التغذية للتعويض عن فترات الاحتفاظ بالمياه الأطول ، مما يؤدي في كثير من الأحيان إلى نمو أبطأ. في أي من النظامين ، يتم تحسين جودة المياه عن طريق إضافة مقشدة بروتين.

مرض

ليس من غير المألوف عن الخيطية ليوكوثريكس البكتيريا لتظهر في بيئة الثقافة الغنية بالبروتين. فيبريو ص. قد تظهر البكتيريا والأمراض المعدية الأخرى. يمكن معالجة هذه الفاشيات بالمضادات الحيوية و / أو السيطرة عليها عن طريق زيادة الملوحة. من المهم استخدام الأكياس المطهرة وتطهير جهاز الاستزراع بشكل روتيني بمحلول هيبوكلوريت.

كما هو مقترح سابقًا ، فإن إنتاج الأرتيميا البالغة الحية بأعداد كافية لإطعام العديد من خزانات الأسماك أو حظائر فرس البحر يتطلب عملاً كبيرًا. متطلبات تغذية الأرتيميا وتنظيف الفلاتر لا تلين على مدار الساعة طوال أيام الأسبوع. من ناحية أخرى ، فإن ثقافة الأرتيميا منخفضة الكثافة مجزية وأقل محاولة. أفضل نصيحة لدينا هي أن نبدأ على نطاق صغير والتوسع تدريجيًا.

مراجع

1 دليل إنتاج واستخدام الغذاء الحي لتربية الأحياء المائية. الورقة الفنية لمصايد الأسماك رقم 361 الصادرة عن منظمة الأغذية والزراعة ، Lavens، P and Sorgeloos، P. 1996، p. 168.


تقييم المخاطر

سيكون علم الأحياء الدقيقة بالمدرسة آمنًا بشكل عام ، ولكن قبل القيام بأي نشاط عملي ، يجب تقييم المخاطر.

كل فرد (طلاب أو فنيين أو مدرسين) يشرع في نشاط عملي هو المسؤول عن صحته وسلامته والآخرين المتأثرين بالعمل.

سيشمل تقييم المخاطر مقارنة الخطوات المتضمنة في نشاط مقصود بالإجراءات المقترحة في تقييمات المخاطر النموذجية. سيحدد هذا احتياطات السلامة التي يجب اتخاذها في سياق مستوى العمل ، وربما الحاجة إلى تعديل الإجراء بحيث يتم تقليل المخاطر على الصحة والسلامة من أي مخاطر / مخاطر.

يجب أيضًا الالتزام بالقواعد المحلية. من الأهمية بمكان في تقييم المخاطر النظر في مهارات وسلوك الطلاب الذين هم على وشك التعامل مع نشاط عملي ، قد يحتاج إجراء آمن لمجموعة واحدة من الأفراد إلى تعديله مع فصل دراسي مختلف.

من المهم أيضًا التأكد من أن الإجراء آمن للتلاميذ ، ولكنه أيضًا لا يعرض للخطر صحة وسلامة الفنيين أو المعلمين أثناء التحضير أو التخلص. عند اتخاذ قرار بشأن الاحتياطات المناسبة لاعتمادها ، من الحكمة التعامل مع جميع الثقافات على أنها مسببة للأمراض (على سبيل المثال ، بسبب التلوث المحتمل).

كما ينبغي النظر في إجراءات الطوارئ ، مثل التعامل مع الانسكابات.


لقاحات الأنفلونزا الخلوية

لا يتطلب إنتاج لقاح الإنفلونزا القائم على الخلايا بيض الدجاج لأن فيروسات اللقاح المستخدمة في صنع اللقاح تزرع في خلايا حيوانية.

ما هي لقاحات الانفلونزا الخلوية؟

يشير lsquoCell-based & rsquo إلى كيفية صنع لقاح الإنفلونزا. يتم إنتاج معظم لقاحات الأنفلونزا المعطلة عن طريق زراعة فيروسات الإنفلونزا في البيض. تُزرع فيروسات الإنفلونزا المستخدمة في اللقاحات القائمة على الخلايا في خلايا مستنبتة من الثدييات بدلاً من الدجاج والبيض.

Flucelvax Quadrivalent هو لقاح الإنفلونزا المعطل الوحيد المستند إلى الخلايا والذي تم ترخيصه من قبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية للاستخدام في الولايات المتحدة.

من يمكنه الحصول على Flucelvax Quadrivalent؟

تم ترخيص Flucelvax Quadrivalent للاستخدام في الأشخاص الذين تبلغ أعمارهم 4 سنوات فما فوق.

لماذا تم تطوير لقاح الأنفلونزا القائم على الخلايا؟

Cell-based flu vaccine production does not use flu viruses grown in eggs and, therefore, is not dependent on the supply of eggs. In addition, cell-based flu vaccines that use cell-based candidate vaccine viruses (CVVs) have the potential to offer better protection than traditional, egg-based flu vaccines. The viruses used to make cell-based vaccines may be more similar to circulating &ldquowild&rdquo flu viruses than the viruses used to make egg-based vaccines. In one study published in the Journal of Infectious Diseases external icon among Medicare beneficiaries 65 years and older, cell-based vaccine provided greater protection against flu-related hospitalizations than standard-dose, egg based vaccine.

For the 2020-2021 flu season, all four flu viruses used in the Flucelvax Quadrivalent are cell-derived, making the vaccine egg-free.

How is the cell-based vaccine manufacturing process different than the traditional egg-based manufacturing process?

The cell-based vaccine manufacturing process uses animal cells (Madin-Darby Canine Kidney, or MDCK cells) as a host for the growing flu viruses instead of fertilized chicken eggs. For the 2020-2021 season, the viruses provided to the manufacturer to be grown in cell culture are cell-derived rather than egg-derived. Learn more about the cell-based flu vaccine manufacturing process on CDC&rsquos How Flu Vaccines are Made web page.

What is the significance of FDA approving cell-based candidate vaccine viruses for use in the Flucelvax Quadrivalent cell-based flu vaccines?

Growing flu viruses in eggs can introduce changes (called egg-adapted changes) that can cause differences between the viruses in the vaccine and the ones that are circulating. These changes may have important implications for the body&rsquos immune response to vaccination. For example, egg-adapted changes could cause the body&rsquos immune system to produce antibodies that are less effective at preventing disease caused by the specific flu viruses in circulation. FDA&rsquos approval of cell-based CVVs for use in cell-based flu vaccines could possibly improve the effectiveness of cell-based flu vaccines.

What are the possible benefits of using cell-based flu vaccines?

Observational studies have shown greater protection against flu or flu-like illness among people who received Flucelvax compared to those who received standard-dose egg-based vaccines.

A potential advantage of cell culture technology is that it might permit faster start-up of the vaccine manufacturing process in the event of a pandemic. The cells used to manufacture Flucelvax Quadrivalent are kept frozen and &ldquobanked.&rdquo Cell banking ensures an adequate supply of cells is readily available for vaccine production. Growing the flu viruses in cell culture for the manufacture of Flucelvax Quadrivalent is not dependent on an egg supply. Cell-based flu vaccines that are produced using CVVs have the potential to be more effective than traditional egg-based flu vaccines.

What were the results of the clinical trials using cell-based technology?

A clinical trial of the previous trivalent formulation of Flucelvax demonstrated effectiveness and safety among persons 18 through 49 years old. In immunogenicity studies among people 18 years and older and 4 through 17 years old, Flucelvax Quadrivalent was found to produce a similar immune response to the trivalent formulation. Post-vaccination symptoms were typical of those seen with other injectable flu vaccines.

Has cell-based technology been used before?

Cell culture technology has been used to produce other U.S.-licensed vaccines, including vaccines for rotavirus, polio, smallpox, hepatitis, rubella and chickenpox.

Cell-based flu vaccines have been approved for use in many European countries.


Why use Drosophila?

Teachers should use fruit flies for high school genetic studies for several reasons:
1. They are small and easily handled.
2. They can be easily anesthetized and manipulated individually with unsophisticated equipment.
3. They are sexually dimorphic (males and females are different), making it is quite easy to differentiate the sexes.
4. Virgins fruit flies are physically distinctive from mature adults, making it easy to obtain virgin males and females for genetic crosses.
5. Flies have a short generation time (10-12 days) and do well at room temperature.
6. The care and culture of fruit flies requires little equipment, is low in cost and uses little space even for large cultures.

By using Drosophila, students will:
1. Understand Mendelian genetics and inheritance of traits
2. Draw conclusions of heredity patterns from data obtained
3. Construct traps to catch wild populations of D. melanogaster
4. Gain an understanding of the life cycle of D. melanogaster, an insect which exhibits complete metamorphosis
5. Construct crosses of caught and known wild- type and mutated flies
6. Learn techniques to manipulate flies, sex them, and keep concise journal notes
7. Learn culturing techniques to keep the flies healthy
8. Realize many science experiments cannot be conducted and concluded within one or two lab sessions

National standards covered in these lessons:
المحتوى:
1. Organisms require a set of instructions for specifying traits (heredity)
2. Hereditary information is located in genes.
3. Combinations of traits can describe the characteristics of an organism.

Students goals:
1. Identify questions and concepts that guide scientific investigations
2. Design and conduct scientific investigations
3. Formulate and revise scientific explanations and models using logic and evidence
4. Communicate and defend a scientific argument

The genetics of Drosophila are well documented and several public-domain web sites feature the complete annotated genome. Therefore, those teachers or students wishing to see where their mutations occur have a ready reference available.

Since Drosophila has been so widely used in genetics, there are many different types of mutations available for purchase. In addition, the attentive student may find mutations within their own wild-caught cultures since, due to a short generation time, mutations are relatively common compared to other animal species.


تصنيف
Domain: Eukarya
المملكة: Animalia
Phylum: Arthropoda
Class: Insecta
Order: Diptera
Family: Drosophilidae
Genus: Drosophila (“dew lover”)
Species: melanogaster (“dark gut”)


دورة حياة ذبابة الفاكهة سوداء البطن
ذبابة الفاكهة سوداء البطن exhibits complete metamorphism, meaning the life cycle includes an egg, larval (worm-like) form, pupa and finally emergence (eclosure) as a flying adult. This is the same as the well-known metamorphosis of butterflies. The larval stage has three instars, or molts.


Day 0: Female lays eggs
Day 1: Eggs hatch
Day 2: First instar (one day in length)
Day 3: Second instar (one day in length)
Day 5: Third and final instar (two days in length)
Day 7: Larvae begin roaming stage. Pupariation (pupal formation) occurs 120 hours after egg laying
Day 11-12: Eclosion (adults emerge from the pupa case).

• The generation time of ذبابة الفاكهة سوداء البطن varies with temperature. The above cycle is for a temperature of about 22°C (72°F). Flies raised at lower temperature (to 18°C, or 64°F) will take about twice as long to develop.
• Females can lay up to 100 eggs/day.
• Virgin females are able to lay eggs however they will be sterile and few in number.

After the eggs hatch, small larvae should be visible in the growing medium. If your media is white, look for the small black area (the mouth hooks) at the head of the larvae. Some dried premixed media is blue to help identify larvae however this is not a necessity and with a little patience and practice, larvae are easily seen. In addition, as the larvae feed they disrupt the smooth surface of the media and so by looking only at the surface one can tell if larvae are present. However, it is always a good idea to double check using a stereo microscope. After the third instar, larvae will begin to migrate up the culture vial in order to pupate.


العمل العملي للتعلم

Incubating the plates to promote growth of الميكروبات is an essential part of any علم الاحياء المجهري تحقيق. Incubating in aerobic conditions, and below human body temperature, reduce the risk of encouraging الكائنات الدقيقة (particularly بكتيريا) that could be pathogenic إلى البشر. Taping the lids on reduces the chance that students will open plates when viewing, but there are details below of how to kill plates completely if this is still a significant risk.

الصحة والسلامة والملاحظات الفنية

Carry out a full risk assessment before starting any microbiology work (see note 1 for more details).

1 Before embarking on any practical microbiological investigation carry out a full risk assessment. For detailed safety information on the use of microorganisms in schools and colleges, refer to Basic Practical Microbiology – A Manual (BPM) which is available, free, from the Society for General Microbiology (email This email address is being protected from spambots. You need JavaScript enabled to view it. ) or go to the safety area of the SGM website (www.microbiologyonline.org.uk/safety.html) or refer to the CLEAPSS Laboratory Handbook, section 15.2.

2 Keep plates at room temperature or incubate at 20-25 °C for 2-3 days. Fungi grow more successfully at lower temperatures. Do not incubate at human body temperature (or above 30 °C) – this reduces the risk of culturing microbes that are pathogens to humans.

3 Reducing the temperature to 4 °C will slow the growth of any cultures – so you can show your students a 2-3 day growth if your lessons are a week apart.

4 All inoculated plates must be taped before incubation to ensure they cannot be opened accidentally. Do this by fixing with 2 or 4 short strips of adhesive tape at opposite edges of the dish. Do not seal completely as this may promote the growth of anaerobic pathogens or prevent normal growth by restricting diffusion of oxygen. See CLEAPSS Laboratory Handbook 15.2.10.

5 Plates are incubated upside down (agar up), so that condensation does not drip onto the plate and interfere with the developing microbes.

6 You might replace lids if condensation makes viewing difficult, so label plates on the bottom – with Chinagraph or wax pencils, permanent marker pens or a small adhesive label at one edge.

7 Count the plates out and in again to ensure that you have collected all the plates at the end of a lesson.

8 You can seal plates around the whole circumference just before viewing if you think there is any risk that your students will open the plates. Or you can stop the growth of a culture completely by placing a piece of filter paper into the lid of the inverted plate. Add a little 40% methanal solution carefully to soak the filter paper and replace the base. Leave for 24 hours. Remove the filter paper, remove any surplus liquid, and reseal the plate. See CLEAPSS Laboratory Handbook section 15.2.11. On Hazcard 063, methanal is described as toxic at this concentration and a category 3 carcinogen.

روابط انترنت

www.microbiologyonline.org.uk/sgmprac.htm
Society for General Microbiology – source of Basic Practical Microbiology, an excellent manual of laboratory techniques and Practical Microbiology for Secondary Schools, a selection of tried and tested practicals using microorganisms.

www.microbiologyonline.org.uk
يتم دعم MiSAC (اللجنة الاستشارية لعلم الأحياء الدقيقة في المدارس) من قبل جمعية علم الأحياء الدقيقة العامة (انظر أعلاه) وتتضمن مواقع الويب الخاصة بهم مزيدًا من معلومات السلامة ورابطًا لطلب النصيحة عبر البريد الإلكتروني.

(تم الوصول إلى المواقع الإلكترونية في أكتوبر 2011)

© 2019 ، الجمعية الملكية لعلم الأحياء ، 1 شارع ناوروجي ، لندن WC1X 0GB جمعية خيرية مسجلة رقم 277981 ، تأسست بموجب الميثاق الملكي


شاهد الفيديو: فرخنا بيض سمان من بنده - تجربة الفقاسة الاوتماتك (ديسمبر 2022).