معلومة

ما هي تجربة "خارج الجسم الحي"؟

ما هي تجربة


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

سؤال المصطلحات البسيط:

  • هل هناك حد صعب بين في المختبر و خارج الجسم الحي?
  • هل هناك حد صعب بين في الجسم الحي و خارج الجسم الحي?

افترض أن خلية عصبية حسية مسجلة كهربائيًا في الإعدادات التالية:

  1. الوصول جراحيًا من خلال جلد الحيوان ، وتثبيته بالرقعة ،
  2. يتم فصل الأنسجة المحيطة بالخلايا العصبية تقريبًا ، ولكنها لا تزال تتدلى من الجزء الأكبر من الحيوان ، ومثبتة بالرقعة ،
  3. كما هو مذكور أعلاه ، ولكن تم قطع الاتصال المتدلي الطفيف ،
  4. يتم عزل العصبون الحسي ووضعه في وسط مؤكسد صناعيًا

يُفترض أن يكون للخلايا العصبية الحسية إشارة تلقائية بحتة ، وهي تتمتع بصحة جيدة في جميع الظروف. ما هي الشروط ، إن وجدت في الجسم الحي, في المختبر، أو خارج الجسم الحي؟ (لا تتردد في اقتراح تجارب افتراضية أفضل. أعرف أن هذا المثال ليس هو الأفضل).

هل أنا الوحيد المرتبك بشأن هذه المصطلحات؟


السابق فيفو تعني ببساطة "خارج الكائن الحي الطبيعي" ، بينما في المختبر تعني "داخل الزجاج" ، عادة في نظام مثقف. إنها ليست متطابقة تمامًا حيث لا توجد حاجة للعمل الذي يتعين القيام به في نظام الثقافة ، على الرغم من كلاهما ليس في الجسم الحي. يمكن فحص الأنسجة المقطوعة خارج الجسم الحي دون أن تكون في أنبوب اختبار ، أو يمكن اختبار الأنظمة الجراحية خارج الجسم الحي على نماذج الأعضاء الاصطناعية. في الجسم الحي يتطلب كائنًا حيًا طبيعيًا ، على الرغم من أنه يعتمد على مقدار تشويشك للطبيعي.

للإجابة على السيناريوهات الخاصة بك ،

  1. في الجسم الحي
  2. خارج الجسم الحي، لأنها ليست داخل الكائن الحي الطبيعي ، على الرغم من أنني أستطيع أن أفهم أن شخصًا ما يعترض على ذلك ؛ بالطبع لا في الجسم الحي، والتي عادة ما تكون للظروف العادية فقط ، بما في ذلك درجة الحرارة.
  3. خارج الجسم الحي
  4. إذا كنت تقصد البيئة المؤكسجة صناعيًا لنظام زراعة الأنسجة ، إذن في المختبر؛ إذا كنت تقصد البيئة المؤكسجة صناعيًا لمنصة المختبر مع صمام $ O_2 $ مفتوح ، إذن خارج الجسم الحي يكفي.

(ليس فقط) تنص ويكيبيديا على ذلك في المختبر و في الجسم الحي لها حدود صعبة للغاية بينهما. أنا شيء يدرس في سياق كائن حي ، دون أن يتم استخراجه ، هو كذلك في الجسم الحيبمجرد استخراجه يتم ذلك في المختبر.

بالمعنى الدقيق للكلمة ، سأحسب فقط أول أمثلة الخلايا العصبية الخاصة بك في الجسم الحي، لأنه لا يزال من المتوقع أن يعمل كما هو الحال داخل الكائن الحي. بمجرد أن تبدأ في جعلها تتدلى ، يتم تدمير "البيئة" الأصلية.

العلاقة بين خارج الجسم الحي و في المختبر أقل تحديدًا. سأعد المثال 2 على أنه خارج الجسم الحي، لكن لا في المختبر، كما يصف مقال ويكيبيديا لـ ex vivo. الشيء نفسه ينطبق على سبيل المثال 3.

المثال 4 بالطبع في المختبر. قابل للنقاش ، إذا في المختبر يستبعد خارج الجسم الحي. لا يزال يتم أخذه من كائن حي ، ولم ينمو بشكل مصطنع ، لذلك ما زلت أفكر فيه خارج الجسم الحي.


إذا قمت بمراجعة المقالات في مجالات مختلفة ، فعادة ما يقول الكيميائيون وعلماء الكيمياء الحيوية أن الخلايا المستنبتة موجودة في الجسم الحي ("الجزيئات التي ندرسها دائمًا في الأنبوب موجودة الآن داخل خلية حية!") ، سيقول الأطباء السريريون إنها في المختبر ("نأخذ بعض الخلايا من المريض ووضعها في أنبوب ") ، علماء بيولوجيا الخلية الذين يعملون مع العينات السريرية ، النماذج الحيوانية ، مزارع الخلايا ، الجزيئات المنقاة ، المجموعة الكاملة ، سيقولون إنها خارج الجسم الحي (" الجزيئات التي ندرسها موجودة في الحياة الخلية ، ولكن تلك الخلية الحية التي ندرسها أيضًا خرجت من الكائن الحي خارج الجسم الحي! ").


يشير المصطلح في الجسم الحي إلى اختبار طبي أو تجربة أو إجراء يتم إجراؤه على (أو في) كائن حي ، مثل حيوان المختبر أو الإنسان.

يشير المصطلح في المختبر ، على عكس في الجسم الحي ، إلى دراسة أو تجربة طبية يتم إجراؤها في المختبر داخل حدود أنبوب الاختبار أو طبق المختبر.

على عكس الدراسات في المختبر ، هناك حاجة لدراسات في الجسم الحي لمعرفة كيف سيستجيب الجسم ككل لمادة معينة. في بعض الحالات ، تكون الدراسات المخبرية للدواء واعدة ، لكن الدراسات اللاحقة في الجسم الحي تفشل في إظهار أي فعالية (أو ، من ناحية أخرى ، تجد أن الدواء غير آمن) عند استخدامه ضمن عمليات التمثيل الغذائي المتعددة التي تحدث باستمرار داخل الجسم.


خارج الجسم الحي وفي المختبر ، ما هو الفرق الواضح؟ - المصطلح (نوفمبر / 12/2006)

& quotin vitro & quot هو: يتم إجراء كل من التجربة والتحليل خارج الكائن الحي ، كما هو الحال في خلية الثقافة في قارورة الثقافة.

& quotex vivo & quot هو: تم إجراء التجربة نفسها داخل الكائن الحي (-s) (في الجسم الحي) ولكن العينات (أي الأعضاء أو الأنسجة) تم إزالتها من الكائنات الحية وتحليلها في الخارج (في المختبر)

ولكن سؤالي هو
1) فهمي صحيح أم لا

2) إذا كان فهمي صحيحًا ، بقدر ما تم إجراء التجربة (أو جزء من التجربة) في الجسم الحي ، بغض النظر عما تم بعد إزالة العينة من الكائن الحي ، فهل يجب اعتباره & quotex vivo & quot؟

أعلم أن تفسيري ليس واضحًا جدًا ، لكن لا يمكنني شرح ما أريد قوله جيدًا

على أي حال ، إذا كان لديك تعريفاتك الخاصة لهذه المصطلحات أو التفسيرات ، فيرجى إبلاغي بذلك & # 33

شكرا لك مقدما.
و
اتمنى لك يوم جيد

في المختبر يعني في الزجاج. هذا هو التجريب الذي يتم خارج الكائنات الحية.
ex vivo هو & quote of living & quot. يشير إلى التجارب التي أجريت في أو على الأنسجة الحية في بيئة مفصلية خارج الكائن الحي. أي فحص CAM.
يتم إجراء خارج الجسم الحي في المختبر. ولكن ليس كل شيء في المختبر هو خارج الجسم الحي.
بالنسبة للجزء 2. أنا & # 39 د أقول إنك على حق.


النشاط التأسيسي في المستقبلات والبروتينات الأخرى ، الجزء ب

ماريا في لانفرانكو. كاثرين أ.كونينغهام ، في طرق في علم الإنزيمات ، 2010

4.5 تطبيق مقايسة qRT-PCR لتقييم 5-HT2 جالتعبير الإسوي لـ RNA في أدمغة الفأر خارج الجسم الحي

نصف هنا تجربة لتقييم 5-HT2 جتعبير إسوفورم RNA RNA خارج الجسم الحي كمثال على فائدة طريقة qRT-PCR. تم استخراج إجمالي الحمض النووي الريبي للدماغ بالكامل من الفئران 129S6 كما هو موضح أعلاه وتحليلها باستخدام مقايسة TaqMan® qRT-PCR في وجود وغياب المنافسين لتقدير 5-HT.2 جR ومقارنة بـ 5-HT2 جR ملف تعريف isoform من دراسات التسلسل المنشورة مسبقًا (Du وآخرون.، 2006). يشير اختبارنا إلى أن الشكل الإسوي ABD هو الأكثر انتشارًا وهذا يتفق مع النتائج التي تم الحصول عليها من خلال تسلسل الحمض النووي المباشر لفئران 129S6 (الشكل 18.3). في أيدينا ، لم يغير وجود المنافسين الكميات المكتشفة للأشكال الإسوية الأربعة مقارنة بالسيطرة (غياب المنافس): ABECD [X 2 (مدافع = 2 ، ن = 9) = 7.200, ص = 0.0036] ، ABD [X 2 (مدافع = 2 ، ن = 9) = 5.600, ص = 0.05] ، ميلادي [X 2 (مدافع = 2 ، ن = 9) = 5.600, ص = 0.05] ، وتحقيقات غير محررة [X 2 (مدافع = 2 ، ن = 9) = 4.622, ص = 0.1] لهذه السلالة (Lanfranco وآخرون., 2009 ).

الشكل 18.3. 129S6 نمط التعبير الدماغ كله الماوس من 5-HT2 جتم الحصول على الأشكال الإسوية R من تسلسل الحمض النووي المباشر (Du وآخرون.، 2006) مقارنة بمقايسة TaqMan® qRT-PCR (Lanfranco وآخرون., 2009 ).

مكونات التفاعل: عشرة ميكرولتر من TaqMan® Genotyping Master Mix، 125 nم البادئات الحسية والمضادة للحساسية ، 100 نم مسبار TaqMan® MGB ، 6 ميكرولتر من [كدنا] ± 2 ميكرولتر 0.1-1 ميكرولترم محلول مخزون من كوكتيل منافس بحجم رد فعل نهائي قدره 20 ميكرولتر.


من التجارب في المختبر إلى إيجابيات وسلبيات الدراسات المجراة والسريرية

يستخدم الباحثون في الطب الحيوي طرقًا مختلفة بما في ذلك حيوانات التجارب والأنسجة ومزارع الخلايا بالإضافة إلى المحاكاة الحاسوبية والدراسات السريرية لإيجاد طرق لعلاج الأمراض والاضطرابات التي تصيب الإنسان. جميع الإجراءات المذكورة لها مزاياها وعيوبها. على سبيل المثال ، على الرغم من أن النماذج الحيوانية توفر بعض العيوب مثل الاختلاف في معايير الحركية الحيوية أو استقراء النتائج للإنسان ، إلا أنها أكثر موثوقية من الاختبارات المعملية. عيب الإجراءات في المختبر هو أنها يتم إجراؤها في الغالب على خطوط الخلايا السرطانية التي لها وظيفة غير طبيعية إلى حد كبير. علاوة على ذلك ، على الرغم من أن النماذج المختبرية تُستخدم بشكل مثمر في المجالات البيولوجية ، فإن العثور على نقطة النهاية ، والهدف الأولي للهجوم الكيميائي ، واستقراء التأثيرات على الإنسان هي بعض نقاط الضعف الحقيقية. قد يؤدي غياب الحركية الحيوية في الأساليب المختبرية إلى سوء تفسير البيانات. انتقدت المراجعة الحالية إيجابيات وسلبيات كلتا الطريقتين ، خاصة في مجالات علم العقاقير وعلم السموم والعلوم الطبية.


المواد والطرق

الحيوانات

تم إجراء جميع التجارب على الحيوانات بعد موافقة لجنة رعاية الحيوان التابعة للمركز الطبي بجامعة ليدن (LUMC) (DEC14190 و DEC14212). تم استخدام الفئران التي تعاني من ضعف المناعة الشديد NOD.Cg-Prkdc Scid Il2rg tm1Wji / Szj (NSG) لجميع تجارب xenografting مع خلايا سرطان البروستاتا البشرية. تم استخدام إناث الفئران العارية (Balb-C nu / nu) للتلقيح التقويمي لخلايا سرطان المثانة البشرية. تم إيواء جميع الفئران في أقفاص مهواة بشكل فردي في ظل ظروف قياسية في مرافق الحيوانات في LUMC. تم توفير الطعام والماء بالشهرة الإعلانية.

Xenografting لخلايا سرطان البروستاتا والمثانة البشرية

تم استخدام الفئران NSG لجميع تجارب xenografting مع خط خلايا سرطان البروستاتا البشري العظمي PC-3M-Pro4. تم خلط 250،000 خلية PC-3M-Pro4 في 10 & # x003BCl PBS مع 10 & # x003BCl عامل النمو المخفض Matrigel (BD Biosciences). بعد ذلك ، تم حقن المعلق تحت الجلد في الخاصرة. من أجل توليد طعم أجنبي لسرطان المثانة البشري ، تم تلقيح 5،000،000 من خلايا UM-UC-3 تقويميًا في إناث الفئران التي تعاني من نقص المناعة (12).

تم حصاد الأورام وجمعها في وسط معزز بالمصل والمضادات الحيوية في درجة حرارة الغرفة. تمت معالجة أنسجة الورم المستأصلة خارج الجسم الحي استزراع أو تثبيته مباشرة في بارافورمالدهيد 4٪ لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة (كما هو موضح أدناه).

زراعة الخلايا

تم الحفاظ على خلايا سرطان البروستاتا البشرية PC-3M-Pro4 في DMEM Glutamax ، 4.5 جم / لتر D-Glucose مع Pyruvate (Gibco) مع 10 ٪ FCII و 1 ٪ بنسلين ستربتومايسين. تم الحفاظ على خلايا سرطان المثانة البشرية UM-UC-3 في EMEM (ATCC) مع 10 ٪ FCS و 1 ٪ من البنسلين الستربتومايسين. تم الحفاظ على جميع الخلايا في حاضنة مرطبة عند 37 & # x000B0C مع 5 ٪ CO2.

فحص الجدوى

تم استخدام العلاج بنطاق جرعة يتراوح من 0.03 إلى 30 نانومتر من docetaxel و 0.05 & # x02013100 نانومتر من gemcitabine لإنشاء ما يسمى & # x0201Cdeath المنحنيات & # x0201D على طبقة متكدسة من PC-3M-Pro4 و UM-UC-3 الخلايا. بعد 72 ساعة من العلاج ، كان 20 & # x003BCl من 3- (4،5 dimethylthiazol-2-yl) -5- (3-carboxymethoxyphenyl) -2- (4-sulfophenyl) -2H-tetrazolium (MTT) (Promega) كان يضاف إلى كل بئر (لوحة 96 بئراً ، كورنينج كوستار). بعد ساعتين ، تم قياس الامتصاصية عند 490 نانومتر (قارئ لوحة Spectramax).

السابق فيفو زراعة شرائح أنسجة الورم

تم جمع أنسجة الورم في درجة حرارة الغرفة وتم قطعها بمقدار & # x0007E1 مم 3 قطع بالملقط والمقص. بعد ذلك ، تم وضع شرائح الأنسجة على إدراج مرشح النيتروسليلوز (6 إدخالات مرشح جيد ، حجم المسام 4 & # x003BCm ، Corning Costar) موضوعة في 6 لوحات ثقافة. تمتلئ أطباق المزرعة بـ 1 مل من وسط المزرعة (13). تمت زراعة أنسجة سرطان البروستاتا في DMEM Glutamax ، 4.5 جم / لتر D-Glucose مع Pyruvate (Gibco) مع 10٪ FCII أو 10٪ FCS و 1٪ بنسلين ستربتومايسين. تم الحفاظ على أنسجة سرطان المثانة في EMEM (ATCC) مع 10 ٪ FCS و 1 ٪ من البنسلين الستربتومايسين.

تمت زراعة شرائح الأنسجة في حاوية مؤكسجة ومختومة تحتوي على 95٪ O2 في وجود الدوسيتاكسيل أو الجيمسيتابين أو محلول المركبات. سابق في المختبر أشارت فحوصات الجدوى إلى حساسية خلايا PC-3M-Pro4 و UM-UC3 للدوسيتاكسيل (IC50 = 1.9 نانومتر) وجيمسيتابين (IC50 = 17.7 نانومتر) ، على التوالي (الأشكال التكميلية 1 أ ، ب). عولجت شرائح الأنسجة بـ 0.3 و 3 نانومتر docetaxel (Sigma-Aldrich) ، و 10 و 100 نانومتر جيمسيتابين (يرجى توفيره من قبل المركز الطبي لجامعة ليدن & # x00027s الصيدلية) أو محلول السيارة (100 ٪ إيثانول 3300 & # x000D7 مخفف في الوسط من أجل docetaxel، 5000 & # x000D7 مخفف في وسط من أجل gemcitabine). بعد زراعة الأنسجة ، تم حصاد الأنسجة ومعالجتها للتحليلات النسيجية (الشكل 1 أ).

شكل 1. السابق فيفو زراعة شرائح أنسجة سرطان البروستاتا والمثانة. (أ) نظرة عامة تخطيطية لملف خارج الجسم الحي نظام الثقافة. تمت معالجة أنسجة الورم البشري (أي المواد المشتقة من خط الخلية أو مادة المريض الأولية) يدويًا في شرائح الأنسجة. تم وضع شرائح أنسجة الورم على مرشح نيتروسليلوز تم وضعه في اتصال مباشر مع وسط زراعة الخلية في لوحة استنبات. بعد ذلك ، تمت زراعة شرائح الأنسجة في نظام مغلق ومزود بالأكسجين لمدة 1 & # x0201310 أيام ومعالجتها من أجل الأنسجة. (ب) تم إنشاء شرائح أنسجة سرطان البروستاتا البشرية من طعوم xenografts PC-3M-Pro4 تحت الجلد في ذكور فئران NSG البالغة وتم تربيتها بعد ذلك لمدة 5 و 10 أيام (انظر قسم المواد والطرق). نتج عن زراعة أنسجة سرطان البروستاتا الحفاظ على بنية الأنسجة لمدة تصل إلى 10 أيام ، كما يتضح من التشكل النووي السليم وبروتين KRT18 الطبيعي في الخلايا السرطانية السليمة والقابلة للحياة. لم يتم الكشف عن أي تغييرات كبيرة في المستويات في كاسباس 3 المشقوق (c-CASP-3) على الثقافة. زادت الخلايا السرطانية الإيجابية KRT18 بشكل مطرد خلال الثقافة. شريط المقياس = 25 & # x003BCm. (ج) تم إنتاج شرائح أنسجة سرطان المثانة البشرية من خلايا UM-UC-3 المزروعة لتقويم العظام. بعد ذلك ، تمت زراعة شرائح أنسجة سرطان المثانة لمدة 5 و 10 أيام. زراعة أنسجة سرطان المثانة خارج الجسم الحي لمدة 5 أيام أدى إلى تحريض كبير لموت الخلايا المبرمج (ص & # x02264 0.001). انخفضت الخلايا السرطانية الإيجابية KRT18 بشكل مطرد خلال المزرعة ، ولكن لا يزال من الممكن اكتشاف بروتين KRT18 السليم بعد 5 أيام من الاستنبات. بعد 10 أيام من الثقافة ، لوحظ وجود تجزئة نووية وبروتين KRT18 المتبقي في الخلايا السرطانية الميتة والميتة. شريط المقياس = 25 & # x003BCm. **ص & # x0003C 0.01 ، ***ص & # x0003C 0.001.

تجميع المخلفات الجراحية

تم الحصول على أنسجة سرطانية أولية ونقيلة للعظام وفقًا للإجراءات القياسية. فيما يتعلق بأنسجة سرطان البروستاتا والمثانة الأولية ، تم الحصول على المادة عن طريق الاستئصال عبر الإحليل. يمكن العثور على البيانات السريرية في الجدول التكميلي 1. بما أن هذا البحث قد تم إجراؤه على & # x0201C النفايات ، & # x0201D الموافقة على استخدام الأنسجة لأغراض البحث وفقًا لقانون البحوث الطبية التي تنطوي على البشر (المنظمة العالمية للأرصاد الجوية) وموافقة الأخلاق المحلية اللجنة غير مطلوب.

علم الأنسجة والتألق المناعي

تم إصلاح أنسجة الورم في بارافورمالدهيد 4٪ لمدة ساعة عند درجة حرارة الغرفة. بعد التثبيت ، تم تجفيف الأنسجة عن طريق الحضانة في سلسلة من التركيزات المتزايدة من الإيثانول. بعد ذلك ، تم تطهير الأنسجة في الزيلين ودمجها في البارافين. تم تصنيع مقاطع البارافين (5 & # x003BCm) وتركيبها على شرائح SuperFrost Plus (Thermo Scientific) (13).

تم إجراء تلطيخ الهيماتوكسيلين ويوزين (H و E) من أجل تقييم الأنسجة العامة. بالنسبة لصبغات التألق المناعي ، فقد تم التخلص من الأقسام عن طريق الحضانة في Histoclear (التشخيصات الوطنية) وتم إجراء استرجاع المستضد عن طريق الغليان في محلول الكشف عن المستضد (Vector Labs) لمدة 40 دقيقة. تم حظر المقاطع في 1 ٪ من الألبومين المصل البقري (BSA) ، مذابة في 0.1 ٪ PBS-Tween (PBST) لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة وحضنت مع الأجسام المضادة الأولية ، كاسباس 3 المشقوق (أرنب polyclonal ، 1: 500 مخفف ، إشارة الخلية Technologies & # x000239661) و cytokeratin-18 (فأر أحادي النسيلة ، 1: 800 مخفف داكو & # x00023M7010) ، ومذاب في PBST عند 4 & # x000B0C بين عشية وضحاها. تم تصوير التلوين بواسطة الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بالفلور Alexa (1: 250 Invitrogen ، 90 دقيقة RT). تم تركيب الشرائح باستخدام كاشف ProLong-Gold المضاد للتلوث الذي يحتوي على DAPI وفقًا لبروتوكول الشركة المصنعة & # x00027s (Invitrogen).

الفحص المجهري والكمي

تم مسح المقاطع الملطخة H و E باستخدام الماسح الضوئي Pannoramic MIDI وتم التقاط الصور المجهرية باستخدام برنامج Caseviewer 2.0 (3D Histech).

تم تصور تلطيخ الفلورسنت عن طريق الفحص المجهري متحد البؤر (مجهر لايكا SP8 متحد البؤر). للتقدير الكمي ، تم عمل 4 صور تقريبًا لكل قسم (تكبير 20x ، دقة 512 & # x000D7 512 بكسل). تم قياس متوسط ​​نسبة التألق في المنطقة باستخدام ImageJ (المعاهد الوطنية للصحة) باستخدام العتبة لتحديد المنطقة الإيجابية.

تحليل احصائي

تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام GraphPad Prism 6.0. من أجل اختبار الاختلاف الإحصائي ، تم إجراء اختبار ANOVA أحادي الاتجاه مع Bonferonni. يتم تمثيل القيم على أنها متوسط ​​& # x000B1 SEM. ص- القيم الأصغر من 0.05 اعتبرت ذات دلالة (*ص & # x0003C 0.05 **ص & # x0003C 0.01 ***ص & # x0003C 0.001).


التجربة 7: الهيكل المادي - ال

أسئلة ما بعد المعمل

  1. ما هي الأجزاء الأربعة للأطراف العلوية والسفلية من الهيكل العظمي الزائدي؟ الأجزاء الأربعة من الطرف العلوي هي الحزام الصدري والذراع والساعد واليد. الأجزاء الأربعة من الطرف السفلي هي حزام الحوض والفخذ والساق والقدم.

31- قارن وقارن بين حجم ووظيفة الأطراف العلوية والسفلية للهيكل العظمي الزائدي. الأطراف السفلية أكبر مقارنة بالأطراف العلوية. هذا لأن الأطراف السفلية مصممة لتحمل وزن جسمك ، وهذا هو السبب أيضًا في أنها تحتوي على وصلات عضلية أكثر من الأطراف العلوية.

32- ما هي العظام الثلاثة المندمجة التي تشكل كوكسي حزام الحوض؟ ما هو موقعهم بالنسبة لبعضهم البعض؟ العظام الثلاثة المندمجة التي تشكل كوكسي حزام الحوض هي الليليوم والإسك والعانة. الإسك هو أقل شأنا وخلفا من الليليوم والجزء الأمامي من عظم الكوكسال مصنوع من العانة.


1. استخراج الحمض النووي الخاص بك محليًا

المكونات: زجاج شفاف ، ملح ، صابون سائل ، عصير جريب فروت ، كحول (مثل المطهر ، الروم ، الفودكا ، إلخ).

تتمثل الخطوة الأولى في البصق على الزجاج وإضافة قليل من الملح إليه. ثم أضف بعض الصابون السائل (مثل الذي تستخدمه لغسل الأطباق) وعصير الجريب فروت وبعض قطرات الكحول. بمجرد أن يكون لديك كل شيء على الزجاج ، حرك الخليط ، وهكذا.

الشعيرات المخاطية البيضاء التي تلاحظها فوق الخليط هي حمضك النووي.

تفسير
يحتوي اللعاب على خلايا من فمك تحتوي على حمض نووي بداخلها. يستخدم المنظف لتفتيت الأغشية التي تحمي الحمض النووي ، وإطلاقه في المتلقي. يجعل الملح الحمض النووي يفسد * ويترسب ، بينما يعمل عصير الجريب فروت على تحييد البروتينات التي يمكن أن تلحق الضرر بالحمض النووي.


علم الأحياء 196 مثال. 4 مختبري وإتقانه

إنزيم تقييد يقطع الحمض النووي بينما يقوم DNA ligase بلصق الحمض النووي.

إنزيم تقييد معين يقطع الحمض النووي فقط عند تسلسل DNA محدد للغاية.

قم الآن بمسح المنشور للعثور على اسم وبيانات اعتماد الشخص الذي كتبه.

مثال: تشير الصفحة إلى أن "شارون بيروني" عضو في مركز سلامة الأغذية. هل يمكنك العثور على أوراق اعتمادها على الموقع؟

بعد ذلك ، هل يمكنك تحديد ما يحاول المصدر تحقيقه من خلال توفير هذه المعلومات؟

أثناء قراءة المنشور ، فكر في جدول أعمال الكاتب فيما يتعلق بالكائنات المعدلة وراثيًا.

كيف يمكنك معرفة ما إذا كانت المعلومات تستند إلى بيانات تم جمعها علميًا وما إذا كانت مدعومة بمصادر أخرى؟

ابحث عن كثب حول صفحة الويب. انقر فوق ارتباط & quotserious risk & quot في الفقرة الرابعة ، ثم انقر فوق & quotscientific review & quot الارتباط في الفقرة السادسة.

الآن ، ابحث عن معلومات حول الكائنات المعدلة وراثيًا على موقعين آخرين على الأقل على شبكة الإنترنت ، بما في ذلك وزارة الزراعة الأمريكية (USDA.gov) ومنظمة الصحة العالمية (WHO.int).

أخيرًا ، كيف يمكنك استخدام تقييمك لسلطة المعلومات ودوافعها وموثوقيتها لتقييم موقع الويب هذا بالنسبة إلى المصادر الأخرى؟ استخدم المقاييس أدناه لتعيين درجة رقمية لهذا المصدر.

هل يمكنك تسمية جزيئات السكر ونوع التفاعل والذرات أو الجزيئات الموضحة في التفاعل الكيميائي أدناه؟

الجزء أ
يوضح هذا الرسم البياني تفاعلًا كيميائيًا يتحد فيه جزيئين من الجلوكوز لتكوين جزيء من المالتوز.

اسحب التسميات إلى مواقعها المناسبة في الرسم التخطيطي.

أولاً ، اسحب الملصقات على الأهداف في المجموعة 1 لتحديد أنواع السكريات ونوع التفاعل الموضح.
ثم اسحب الملصقات على الأهداف في المجموعة 2 لتحديد الذرات أو المجموعات الكيميائية أو الجزيئات المعنية.

هل يمكنك تسمية هياكل خلية بدائية النواة؟

في هذا الفصل ، ستتعرف على التجارب التي حددت الحمض النووي باعتباره المادة الجينية ، وبنية الحمض النووي وكيف تم اكتشافه ، وكيف يتم تكرار الحمض النووي ، وكيف يتم ترتيبه في الكروموسوم والنواة. قبل أن تبدأ هذا الفصل ، يجب أن تكون قادرًا على وصف كيفية تنفيذ الإنزيمات للتفاعلات (انظر المفهوم 8.4 والشكل 8.16). يوفر السؤال التالي فحصًا سريعًا لمعرفتك الأساسية في هذا المجال.

هل يمكنك ملء الجدول الذي يلخص كيفية عمل lac operon في الإشريكية القولونية بشكل صحيح؟

تتكون بوليمرات الحمض النووي من مونومرات النيوكليوتيدات.

في هذا الفصل ، ستتعرف على هياكل ووظائف الفئات الأربع للجزيئات البيولوجية الكبيرة. قبل البدء في هذا الفصل ، يجب أن تكون قادرًا على شرح سلوك الترابط لذرة الكربون (انظر المفهوم 4.2 ، القسم المعنون & quot تكوين الروابط مع الكربون & quot). يوفر السؤال التالي فحصًا سريعًا لمعرفتك الأساسية في هذا المجال.

في هذا الفصل ، ستتعرف على هياكل ووظائف الفئات الأربع للجزيئات البيولوجية الكبيرة. قبل أن تبدأ هذا الفصل ، يجب أن تكون قادرًا على تحديد المجموعات الوظيفية البيولوجية المهمة (انظر الشكل 4.9). يوفر السؤال التالي فحصًا سريعًا لمعرفتك الأساسية في هذا المجال.

الجزء أ - فهم التصميم التجريبي
تُظهر المخططات تسلسل الحمض النووي السليم (أعلى) وتسلسلات الحمض النووي التجريبية الثلاثة. تشير علامة X الحمراء إلى عنصر التحكم المحتمل (1 أو 2 أو 3) الذي تم حذفه في كل تسلسل DNA تجريبي. تمثل المنطقة بين الخطوط المائلة ما يقرب من 8 كيلو قواعد من الحمض النووي الموجودة بين المروج ومنطقة المحسن. يوضح الرسم البياني الشريطي الأفقي كمية الجين المراسل mRNA الذي كان موجودًا في كل ثقافة خلية بعد 48 ساعة بالنسبة إلى الكمية التي كانت في الثقافة التي تحتوي على منطقة المحسن السليمة (الشريط العلوي = 100٪).

هل يمكنك تسمية الهياكل بشكل صحيح في هذا الرسم البياني الذي يلخص تعبئة الكروموسومات؟

هل يمكنك إكمال هذه الجمل حول الدهون؟

2. يتكون جزيء الدهون من نوعين من الجزيئات الأصغر: الجلسرين والأحماض الدهنية.

3. يتكون الحمض الدهني من مجموعة كربوكسيل وسلسلة هيدروكربونية طويلة.

4. الأحماض الدهنية غير المشبعة لها رابطة مزدوجة واحدة أو أكثر في سلاسل الهيدروكربون الخاصة بها وعادة ما توجد في الزيوت النباتية.

5. سلاسل الهيدروكربون للأحماض الدهنية المشبعة غير ملتوية ، وبالتالي تتجمع بشكل وثيق معًا ، مما يجعل الدهون الحيوانية صلبة في درجة حرارة الغرفة.

6. الفسفوليبيدات هي عنصر رئيسي في أغشية الخلايا. إنها تشكل طبقة ثنائية مع ذيلها الكارهة للماء تختلط معًا وتواجه رؤوسها المحبة للماء البيئة المائية على جانبي الغشاء.


التحضير التجريبي للتركيبات المؤقتة لقشر البصل

التحضير التجريبي للتركيبات المؤقتة لقشر البصل!

تجربة:

موضوعي:

لتحضير طبقة مؤقتة ملطخة من قشر البصل ولتسجيل الملاحظات ورسم المخططات المعنونة.

الأجهزة والمواد المطلوبة:

بصلة ، شريحة زجاجية ، زجاج ساعة ، ساترة ، ملقط ، إبر ، فرشاة ، شفرة ، ورق ترشيح ، سافرين ، غليسيرين ، قطارة ، ماء ، ومجهر مركب.

نظرية:

تتكون جميع الكائنات الحية من خلايا. يختلف شكل وحجم وعدد هذه الوحدات باختلاف الكائنات الحية. المكونات الثلاثة الرئيسية للخلية هي غشاء الخلية والسيتوبلازم والنواة. في الخلية النباتية ، يحيط جدار الخلية بغشاء الخلية.

إجراء:

1. خذ بصلة وأزل قشرتها الخارجية.

2. قم الآن بقطع جزء صغير من ورقة المقياس الداخلية بمساعدة نصل.

3. افصل قشرة رقيقة وشفافة عن السطح المحدب لأوراق المقياس بمساعدة الملقط.

4. حفظ هذا القشر في ساعة زجاجية تحتوي على الماء؟

5. أضف قطرتين من بقعة السافرانين في زجاج الساعة لتلطيخ القشر.

6. خذ شريحة نظيفة وضع قطرة من الجلسرين في وسط الشريحة.

7. بمساعدة فرشاة وإبرة انقل القشر على الشريحة. يمنع الجلسرين القشر من الجفاف.

8. قم بتغطيته بغطاء غطاء وتجنب أي فقاعة هواء من الدخول إلى غطاء الغطاء.

9. أزل أي زائدة من الجلسرين بورق ترشيح.

10. لاحظ التركيب المعد للقشر تحت التكبير المنخفض والعالي لمجهر مركب.

ملاحظات:

يظهر عدد كبير من الخلايا المستطيلة. تقع هذه الخلايا بالقرب من بعضها البعض مع وجود مسافات بين الخلايا بينها. هذه الخلايا محاطة بجدران خلوية متميزة. تحتوي هذه الخلايا على نواة ملطخة داكنة وفجوة كبيرة في المركز.

احتياطات:

1. ينبغي تجنب المبالغة والتفاهم.

2. يجب تجنب طي القشرة.

3. يجب استخدام شريحة زجاجية نظيفة وجافة وغطاء زجاجي.

4. يجب وضع غطاء حماية لتجنب أي فقاعات هواء.

التجربة 1.2:

موضوعي:

لتحضير تراكب مؤقت ملطخ لخلايا خد الإنسان وتسجيل الملاحظات ورسم المخططات الموصوفة

الأجهزة والمواد المطلوبة:

مسواك ، شريحة ، ساترة ، ورق ترشيح ، إبر ، فرشاة ، زجاج ساعة ، أزرق ميثيلين ، قطارة ، جلسرين ، ماء ومجهر مركب

نظرية:

عادة ما تكون الخلايا الحيوانية غير منتظمة الشكل. ليس لديهم جدار خلية. وهي محاطة بغشاء خلوي وتحتوي على السيتوبلازم والنواة.

إجراء:

1. بمساعدة الطرف المسطح لعود أسنان مغسول ، كشط برفق داخل خدك.

2. ضع الكشط في وسط شريحة زجاجية نظيفة.

3. أضف قطرة ماء قاحلة قطرة من الميثيلين الأزرق.

4. بعد دقيقة واحدة ، قم بإزالة الماء الزائد الممزوج بأزرق الميثيلين عن طريق إمالة الشريحة قليلاً.

5. ضع قطرة من الجلسرين فوق الكشط الملطخ وقم بتغطيتها برفق بغطاء.

6. قم بإزالة الجلسرين الزائد باستخدام ورق الترشيح.

7. مراقبة الكشط تحت التكبير المنخفض والعالي من المجهر.

ملاحظات:

يتم رؤية العديد من الخلايا المسطحة أو البيضاوية أو غير المنتظمة. يحيط غشاء الخلية السيتوبلازم الهياليني ونواة كثيفة بيضاوية. جدار الخلية غائب كما هو الحال في جميع الخلايا الحيوانية.

احتياطات:

1. يجب كشط الخدين برفق لتجنب أي إصابة.

2. ينبغي تجنب الإفراط في تلطيخ الخلايا وتلطيخها.

3. يجب وضع الغطاء بحذر لتجنب دخول فقاعات الهواء.


مناقشة

يمكن فحص البوليمرات المستجيبة للأس الهيدروجيني أو العوامل الأخرى المصممة لوظيفة التحلل الداخلي بسرعة وفعالية بناءً على تحلل خلايا الدم الحمراء عند قيم الأس الهيدروجيني الموجودة في الجسيم الداخلي (شكل 1 الرقم الهيدروجيني 6.8 - الجسيم الداخلي المبكر ، الرقم الهيدروجيني 6.2 - الجسيم الداخلي المتأخر ، الرقم الهيدروجيني 5.6 - الليزوزوم). تم استخدام انحلال الدم المعتمد على الرقم الهيدروجيني 14-17 لفحص قدرة الناقلات على التوسط في إطلاق الجسيم الداخلي للعلاجات الجزيئية الحيوية (على سبيل المثال يمكن أن تكون نتائج هذا الاختبار تنبؤية للأداء كوسيلة لتوصيل الدواء داخل الخلايا. 3،4،8،18،19 وهكذا ، يمثل هذا الاختبار شاشة فعالة لقياس قدرة ناقلات الأدوية البوليمرية للتوسط في توصيل الأدوية داخل الخلايا بناءً على اضطراب الغشاء المعتمد على الرقم الهيدروجيني.

كما لوحظ في الإجراء ، يتم الكشف عن انحلال الدم من خلال القياس الطيفي للطاف لخلايا الدم الحمراء المعالجة بعوامل تجريبية. لذلك ، بالإضافة إلى الهيموجلوبين ، من المحتمل أن يحتوي على مكونات عصارية خلوية مشتقة من كريات الدم الحمراء ، بما في ذلك البروتينات والكربوهيدرات. في حين أن هذه المكونات الأخرى قد تساهم بكمية صغيرة من الإشارة في القياس الطيفي ، فقد تمت معايرة انحلال الدم بنسبة 100٪ إلى محلول كرات الدم الحمراء الناتج عن العلاج باستخدام Triton X-100. بافتراض أن جميع كريات الدم الحمراء من نفس المتبرع تحتوي على مستويات متشابهة من الهيموجلوبين والجزيئات الحيوية الأخرى ، يمكننا أن نستنتج بأمان أن المكونات "الملوثة" لن تساهم بأي آثار في قياس انحلال الدم ، خاصةً إذا تم استخدام نفس عينة الدم لجميع الاختبارات. ومع ذلك ، فإن هذا يسلط الضوء على احتمال وجود اختلافات صغيرة يومًا بعد يوم في تكوين الدم والهيماتوكريت ، بالنسبة لأي متبرع بالدم ، وبالتالي يجب أن تكون عينات المراقبة الداخلية (الخطوات 3.3-3.4 ، 3.10-3.11). تحليل لجميع التجارب.

يجب على المرء دائمًا فحص بيانات الامتصاص الخام عن كثب. على الرغم من أنه لا يمكن تقديره في بيانات المثال المعيارية الموضحة في الشكل 2تعمل المنظفات مثل Triton X-100 على زعزعة استقرار أغشية كرات الدم الحمراء بشكل فعال بغض النظر عن الرقم الهيدروجيني ، وينبغي للمرء أن يتوقع رؤية عينة قليلة جدًا لأخذ عينات من التباين في الضوابط الإيجابية. لا يشتمل طيف الامتصاص لـ Triton X-100 على قمم في النطاق 400-600 نانومتر الموصى به لهذا الاختبار ، وبالتالي ، يجب ألا يتداخل مع تطبيع البيانات التجريبية. 20 علاوة على ذلك ، بالنسبة لعينات التحكم السلبية ، لا ينبغي للمرء أن يلاحظ انحلال الدم بشكل كبير بعد الحضانة لمدة ساعة في أي من المحاليل المعيارية المستخدمة (بمعنى آخر. حتى العازلة الأكثر حمضية لا تولد عادةً انحلال الدم في هذا الإطار الزمني). يجب أن تقترب قراءات الخلفية لعينات التحكم السلبية عن كثب من قراءات امتصاص الخلفية المأخوذة على المحاليل المعيارية الجديدة.

من الناحية المثالية ، سيستخدم الباحثون استراتيجيات تكميلية لوصف أنظمة توصيل الأدوية التجريبية الخاصة بهم. يعتبر اختبار انحلال الدم مفيدًا للفحص الأولي لعامل التحلل الداخلي على الأغشية الحيوية التي تحدث بشكل طبيعي ، ولكن يجب اعتبارها واحدة فقط من الأدوات العديدة في أسلحة باحث توصيل الدواء لاختبار عوامل توصيل العصارة الخلوية. على سبيل المثال ، أحد أوجه القصور المحتملة في مقايسة انحلال الدم هو أنه يستخدم غشاء خلايا الدم الحمراء كنموذج بيولوجي للأغشية الباطنية. ومع ذلك ، يختلف محتوى الماكياج والدهون في الأغشية الداخلية باختلاف نوع الخلية وقد لا يتم إعادة تلخيصها بدقة بواسطة غشاء خلايا الدم. 1 تم تطوير مجموعة متنوعة من المقايسات التكميلية الأخرى لتقليد تكوين وسلوك الغشاء الداخلي. 21،22 أحد البدائل هو استخدام الجسيمات الشحمية المحتوية على نقل طاقة الرنين الفلوري (FRET) المروى الفلوري ، والتي تصبح غير مطموسة بعد زعزعة استقرار الجسيمات الشحمية وإطلاق الفلوروفورات إلى الوسائط المحيطة. في الدراسات التي تستخدم هذه الطريقة ، وجد أن القياس الكمي للفلوروفور غير المروي يرتبط بقدرة السيارة على التوسط في الهروب الداخلي لحملتها. يمكن أن توفر القياسات المستندة إلى الفحص المجهري 21،23 طريقة أكثر قوة ولكن منخفضة الإنتاجية تكون مكملة لمقايسة انحلال الدم. على سبيل المثال ، من الشائع تقييم عملية تحديد موقع الحامل أو الدواء نفسه مع الجسيمات الحالة المصبوغة (على سبيل المثال LysoTracker بواسطة Life Technologies) ، أو يمكن تمييز مسارات التهريب باستخدام أصباغ حساسة للأس الهيدروجيني مترافقة مع الناقل أو الدواء (على سبيل المثال pHrodo by Life Technologies). 24-26

بمجرد تأكيد نظام توصيل التحلل الداخلي لتحقيق توصيل البضائع الخلوية ، يمكن أن يوفر اختبار انحلال الدم أيضًا معلومات حول الآلية التي يحدث من خلالها الهروب داخل الجسم. على سبيل المثال ، تفتقر مركبات توصيل الجينات القائمة على البولي إيثيلين أمين (PEI) إلى القدرة الكامنة على تعطيل أغشية الفسفوليبيد عند الأس الهيدروجيني المحايد أو الحمضي. بدلاً من ذلك ، تحقق PEI توصيل الجينات الخلوية من خلال تأثير "الإسفنج البروتوني". بعد الاستيعاب الداخلي ، يحمي PEI الجسيم الداخلي عن طريق "امتصاص" البروتونات التي يتم ضخها عبر الغشاء الداخلي لتحمض هذه الأجزاء. في النهاية ، يؤدي هذا إلى تراكم البروتونات الزائدة وأيوناتها المضادة داخل الجسيم الداخلي. ينتج عن هذا ارتفاع في الضغط الاسموزي وتدفق المياه وتورم الحويصلة والتحلل الداخلي. لذلك ، فإن نجاح تأثير الإسفنج البروتوني يستلزم تراكم تركيز حرج من PEI في جسيم داخلي. 27 مركبات التوصيل التي تحدث اضطرابًا داخليًا من خلال تأثير "الإسفنج البروتوني" لن تؤدي إلى تعطيل خلايا الدم الحمراء أو الجسيمات الشحمية جسديًا ، ويجب تقييم فعاليتها في تحقيق توصيل الدواء داخل الخلايا من خلال حسابات الضغط الاسموزي ، أو في المختبر الفحص المجهري أو الدراسات الوظيفية.

في الختام ، يعتبر اختبار انحلال الدم الموصوف هنا نموذجًا موثوقًا به لفحص العوامل الصيدلانية المصممة للتسليم داخل الخلايا للأدوية البيولوجية. يوفر هذا الاختبار وسيلة عالية الإنتاجية لفحص مركبات توصيل الأدوية ، مما يتيح التطور السريع للتركيبات التي تقدم المستحضرات الدوائية الحيوية مع أهداف داخل الخلايا.